Proces izolacji RNA jest jednym z kluczowych etapów badań genetycznych, molekularnych i biotechnologicznych. Właściwie przeprowadzona izolacja pozwala na uzyskanie wysokiej jakości materiału do analizy, co przekłada się na niemal idealną wiarygodność wyników. Co jednak warto wiedzieć na jej temat i w jaki sposób prawidłowo ją przeprowadzić?
RNA – co to takiego?
RNA, a więc popularny kwas rybonukleinowy, jest jednym z najważniejszych składników komórkowych. Występuje on w wielu formach, do których zaliczamy chociażby mRNA, tRNA czy rRNA. Każda z nich pełni unikalne funkcje w procesach komórkowych. RNA odpowiada między innymi za przekazywanie informacji genetycznej z DNA do miejsc syntezy białek, co czyni go niezwykle ważnym elementem w regulacji procesów biologicznych. W badaniach biologicznych izolacja RNA jest naprawdę istotna, albowiem umożliwia analizę ekspresji genów, badanie struktury genomu, a nawet prowadzenie eksperymentów związanych z terapiami genetycznymi. Ze względu na swoją sporą wrażliwość na degradację przez enzymy rybonukleazy RNA wymaga szczególnej uwagi i precyzji podczas procesu izolacji. Aby wykonać izolację całkowitego RNA, niezbędne jest skorzystanie ze specjalnego zestawu. Tego typu produkty i wiele innych akcesoriów służących do pracy w warunkach laboratoryjnych znajdziesz pod adresem: https://abo.com.pl/oczyszczanie-kwasow-nukleinowych/rna-calkowite.
Co jest potrzebne do izolacji całkowitego RNA?
Proces izolacji RNA wymaga zastosowania specjalistycznych narzędzi, odczynników i technik. Warto podkreślić, że laboratoria korzystają z metod opartych na izolacji chemicznej. Wśród nich szczególnie popularne jest użycie trizolu lub metod kolumnowych, które zapewniają bardzo szybkie i efektywne oddzielenie RNA od innych składników komórkowych. Ważnym elementem procesu jest także odpowiednia liza komórek, która umożliwia uwolnienie RNA, a w dalszej kolejności jego skuteczne oczyszczenie. Niezbędne jest również zapewnienie sterylnych warunków pracy oraz zastosowanie materiałów odpornych na RNazy. W tym przypadku bardzo dobrze sprawdzą się solidne rękawice lateksowe, pipety wolne od DNaz i RNaz, a także hermetycznie zamknięte probówki. Istotne jest bez wątpienia odpowiednie przechowywanie odczynników, zwłaszcza w niskiej temperaturze, aby uniknąć ich niepożądanej degradacji. Dzięki temu proces izolacji całkowitego RNA powinien przebiec bez żadnych problemów.
Bezpieczna izolacja całkowitego RNA – o czym pamiętać?
Bezpieczeństwo izolacji RNA wiąże się zarówno z ochroną samych próbek, jak i dokładnym przestrzeganiem wszelkich protokołów laboratoryjnych. Kluczowym wyzwaniem jest z pewnością dokładna ochrona RNA przed degradacją, która może nastąpić już w momencie pobrania próbki. Dlatego też niebywale istotne jest, aby jak najszybciej po pobraniu zabezpieczyć próbkę w odpowiednich warunkach. Warto zamrozić ją chociażby w ciekłym azocie. Dzięki temu prace laboratoryjne powinny dać zamierzony skutek. Unikanie kontaminacji RNA wymaga pracy w idealnie sterylnych warunkach, a także częstego czyszczenia powierzchni roboczych oraz sprzętu laboratoryjnego. Nawet drobne ślady RNaz mogą doprowadzić do całkowitej utraty jakości próbki. Rekomenduje się także używanie sprawdzonych odczynników chemicznych o bardzo wysokiej czystości oraz unikanie wielokrotnego zamrażania i rozmrażania próbki. Dzięki temu izolacja całkowitego RNA powinna być w pełni bezpieczna oraz skuteczna. Pamiętaj jednak, aby przeprowadzać ją zgodnie ze wskazówkami zawartymi w zestawie przeznaczonym do izolacji całkowitego RNA z DNazą.
Artykuł sponsorowany